Отримання препаратів цитоплазматичної мембрани з коренів гороху методом двофазової водно-полімерної системи

Abstract

З клітин коренів проростків гороху методом розділення мікросомальної фракції у двофазовій водно-полімерній системі отримано фракцію цитоплазматичної мембрани з незначними домішками. Чистота отриманих препаратів оцінювалася за активністю маркерних ферментів та електронно мікроскопічним аналізом специфічної реакції з кремній вольфрамовою кислотою. Виділені препарати представляють собою везикули цитоплазматичної мембрани, вивернуті цитоплазматичною стороною назовні, які зберігають АТФ-гідролітичну активність. Досліджені фактори, які сприяють підвищенню виходу препаратів цитоплазматичної мембрани. Ключові слова: Цитоплазматична мембрана, двофазова водно-полімерна система, мікросомальна фракція, АТФ-гідролітична активність, маркерні ферменти.

The preparations of plasma membrane with high purity were obtained from roots of pea seedlings by aqueous two-phase partition. These preparations contained sealed plasma membrane vesicles with an insignificant contamination of other membranes. Obtained plasma membrane preparations were right-sideout vesicles that maintained the ATP-hydrolyzing activity. To obtain the membrane pellets with most volumes the separation procedures were optimized. Key words: plasma membrane, aqueous polymer two-phase system, microsomal fraction, ATP-hydrolyzing activity, membrane markers.