Extracellular fructose bisphosphatase of Bacillus subtilis: purification and some properties

Abstract

For the first time the extracellular fructose bisphosphatase (Ff BF ase) (EC 3.1.3.11) from the spore-forming bacterium Bacillus subtilis was studied. The specific activity of obtained preparations of FBFase ranges 52,9 un/mg of protein. Maximum activity of the enzyme is observed with substrate at 2mM concentration. The enzyme is inactivated in absence of Mg2- or Mn2+. AMP inhibited of FBFase activity but the presence of PEP reduces of this effect. Heavy metal ions at the concentration of 0,1mM in presence of Mg2 are not inhibitors. Effect of Zn2 ions on the enzyme activity is different depending on pH and Mg2 and EDTA presence. Monovalent cations only at low concentrations are insignificant effectors of extracellular FBFase. On the contrary, Ag ions don’t effect on the enzyme activity at low concentrations but at high ones activate it thrice.

Вперше було отримано позаклітинну фруктозо бісфосфатазу (ФБФазу) (КФ 3.1.3.11) Bacillus subtilis. Препарати ферменту мали питому активність 52.9 од/мг білку. Активність позаклітинної ФБФази абсолютно залежить від катіонів Mg2 або Mn2 . Встановлено, що максимум активності ферменту спостерігається при концентрації субстрату 2mM. Інгібіторну дію на активність позаклітинної ФБФази В. subtilis має АМФ, який зменшується за наявності в реакційній суміші ФЕП. При концентрації 10 -4 М катіони важких металів не були інгібіторами за умови наявності іонів Mg2 в реакційній суміші. Iони Zn2 в залежності від рН та наявності в реакційній суміші іонів Мg2 і ЕДТА по-різному впливали на активність позаклітинного ферменту. Моновалентні катіони є незначними ефекторами позаклітинної ФБФази і лише при низьких концентраціях.