Оцінка рівня простагландину Е2, тромбоксану B2 та лейкотрієну B4 у нирках при змодельованому нефриті Хеймана під впливом безклітинних кріоконсервованих біологічних засобів

Abstract

Захворювання нирок яке характеризується відкладення імунних комплексів на базальній мембрані клубочка має назву мембранозна нефропатія (МН). Хоча кінцевою метою лікування цього органоспецифічного аутоімунного захворювання є припинення імунної відповіді на PLA2R або інші антигени подоцитів, повільне зниження титрів циркулюючих антитіл після лікування ставить подоцити під загрозу подальшого пошкодження. У якості потенційних засобів для лікування хворих на МН нашу увагу привернули безклітинні кріоконсервовані біологічні засоби (БКБЗ), зокрема – кріоекстракт плаценти (КЕП), кріоекстракт селезінки (КЕС) та кондиціоноване середовище мезенхімальних стовбурових клітин (КС-МСК). Мету дослідження – охарактеризувати рівень простагландину (ПГ) Е2, тромбоксану (Тх) B2 та лейкотрієну (ЛТ) B4 у нирках щурів при змодельованому нефриті Хеймана під впливом безклітинних кріоконсервованих біологічних засобів. Матеріали та методи. Аутоімунний нефрит (АІН) відтворювали за методи-кою Heymann W.R. та співав. Дослідження ефективності БКБЗ при АІН проведені на 42 шурах-самцях. На 70 день експерименту щурів виводили з експерименту та екстирпували нирки. Для отримання гомогенату нирки промивали холодним (+4°С) ізотонічним 1,15 % розчином КCl та гомогенізували. Вміст ПГЕ2, ЛТВ4 та ТхВ2 визначали імуноферментним методом за допомогою стандарт-них наборів для імуноферментного аналізу (Neogen Corporation, США). Результати досліджень та їх обговорення. Експериментальні дослідження показали, що у щурів на тлі розвитку АІН відбувається кратне зростання вмісту досліджуваних ейкозаноїдів у тканині нирок. Застосування референс-препарату канефрону викликало зниження вмісту досліджуваних ейкозаноїдів у тканинах нирок щурів з АІН на 19,0–23,6 % в середньому. На тлі введення досліджуваних БКБЗ найвиразніші зміни відмічено з боку вмісту ЛТВ4. Оцінка рівня ТхВ2 у нирках щурів з АІН на тлі введення БКБЗ показала, що зазначений ейкозаноїд найвиразніше знизився (р˂0,001) на тлі застосування КС-МСК (44,4%). Введення КЕС та КЕП призвело до співставного зниження рівня ПГЕ2 у тканинах нирок щурів з АІН відповідно на 26,4% (р˂0,001) та на 26,7% (р˂0,001). Висновки. На тлі введення КЕП вміст ЛТВ4 у щурів з АІН знизився (р=0,005) на 42,9%. Оцінка вмісту ПГЕ2 у тканинах нирок щурів з АІН показала, що найвиразніше вказаний показник знизився (р˂0,001) на тлі введення КС-МСК (43,5%). Вміст ТхВ2 аналогічно найвиразніше знизився (р˂0,001) на тлі застосування КС-МСК (44,4%).

A kidney disease characterized by the deposition of immune complexes on the glomerular basement membrane is called membranous nephropathy (MN). Although the ultimate goal of treatment for this organ-specific autoimmune disease is to terminate the immune response to PLA2R or other podocyte antigens, the slow decline in circulating antibody titers after treatment puts podocytes at risk of further damage. Cell-free cryopreserved biological agents (CFCBA), in particular, cryopreserved placental extract (CEP), spleen cryoextract (CES) and conditioned medium of mesenchymal stem cells (MSC-CM) attracted our attention as potential means for the treatment of patients with MN. The purpose of the study is to characterize the level of prostaglandin (Pg) E2, thromboxane (Tx) B2 and leukotriene (LT) B4 in the kidneys of rats with simulated Heyman's nephritis under the influence of cell-free cryopreserved biological agents. Materials and methods. Autoimmune nephritis (AIN) was reproduced according to the method of Heymann W.R. and sang Research on the effectiveness of CFCBA in AIN was conducted on 42 male sheep. On the 70-th day of the experiment, the rats were removed from the experiment and the kidneys were excised. To obtain a homogenate, the kidneys were washed with cold (+4°C) isotonic 1.15% KCl solution and homogenized. The content of PgE2, LTB4 and TxB2 was determined by the enzyme-linked immunosorbent assay method using standard kits for enzyme-linked immunosorbent assay (Neogen Corporation, USA). Research results and their discussion. Experimental studies have shown that in rats, against the background of the development of AIN, there is a multiple increase in the content of eicosanoids in the kidney tissue. The use of the reference drug canefron caused a decrease in the content of the studied eicosanoids in the kidney tissues of rats with AIN by 19.0–23.6% on average. Against the background of the introduction of the investigated CFCBA, the most pronounced changes were noted from the side of LTB4 content. The evaluation of the level of TxB2 in the kidneys of rats with AIN against the background of CFCBA administration showed that the specified eicosanoid decreased most significantly (р˂0.001) against the background of MSC-CM application (44.4%). The introduction of CES and CEP led to a relative decrease in the level of PgE2 in the kidney tissues of rats with AIN by 26.4% (p˂0.001) and 26.7% (p˂0.001), respectively. Conclusions. Against the background of the introduction of CEP, the content of LTB4 in rats with AIN decreased (p=0.005) by 42.9%. The assessment of the PgE2 content in the kidney tissues of rats with AIN showed that the most clearly indicated indicator decreased (р˂0.001) against the background of the introduction of MSC-CM (43.5%). Similarly, the content of TxB2 decreased most significantly (р˂0.001) against the background of the use of MSC-CM (44.4%).